（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體
鈉鉀ATP酶通道蛋白抗體
AGXT2L2蛋白抗體
β淀粉樣蛋白胞內結構域相關蛋白1抗體
錨蛋白重復及SAM結構域蛋白6抗體
二磷酸腺苷核糖基轉移酶3抗體
二磷酸腺苷核糖基轉移酶5抗體
腺苷單磷酸脫氨酶1抗體
紅細胞蛋白Ank1抗體
腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體
α1B糖蛋白抗體
載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體
凋亡誘導因子3抗體
凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體
凋亡誘導蛋白D抗體
酸性神經(jīng)鞘磷脂酶抗體
腺嘌呤核苷酸轉運蛋白1抗體
ATP酶H+轉運溶酶體輔助蛋白2抗體
肝素結合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體
核突觸蛋白抗體
β-肌動蛋白/β-Actin 抗體（內參抗體）
β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體
β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體