综合色亚洲,亚洲久久999www嫩草,91成人,操,国产三级午夜黄色片

產(chǎn)品列表PROUCTS LIST
新聞動態(tài)NEWS
技術(shù)文章Article 當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 詳細(xì)內(nèi)容
細(xì)胞感染有以下三種
點(diǎn)擊次數(shù):2138 更新時(shí)間:2016-09-12

細(xì)胞感染有以下三種
(一)細(xì)胞準(zhǔn)備
將狀態(tài)良好的目的細(xì)胞接種到24孔板,使細(xì)胞濃度為 1×105/ml 細(xì)胞,接種細(xì)胞數(shù)量因細(xì)胞的生長速度而略有不同, 一般是保證第二天進(jìn)行病毒感染的時(shí)候細(xì)胞匯合率介于 50%至70%之間。
(二)病毒感染
1.感染細(xì)胞MOI 的測定MOI(Multiplicity of Infection,感染復(fù)數(shù))是指每個(gè)細(xì)胞感染的病毒數(shù),通常MOI 越高,病毒整合到染色體的數(shù)量以及目的蛋白的表達(dá)量越高。對于分裂活躍的細(xì)胞,比如 Hela、293 細(xì)胞,MOI=1~3 時(shí),80%以上的細(xì)胞均表達(dá)目的基因。而對于非分裂細(xì)胞,比如原代細(xì)胞,感染效率較低。需要進(jìn)行MOI梯度摸索實(shí)驗(yàn),選擇適合的MOI 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
2.感染步驟
按實(shí)驗(yàn)需要將細(xì)胞鋪板(比如12孔板);細(xì)胞數(shù)以第2天密度約50%為宜;37℃ 培養(yǎng)過夜。
對于Polybrene 可施加的細(xì)胞:準(zhǔn)備*培養(yǎng)基和 Polybrene混合物,Polybrene 終濃度為摸索得到的zui適終濃度。移去培養(yǎng)基并添加 0.5 ml Polybrene/培養(yǎng)基混合物于每孔中(適用于24 孔板,其他孔板請相應(yīng)調(diào)整體)。
對于不適用 Polybrene 的細(xì)胞,以上步驟省略,直接進(jìn)入下面步驟:
感染前,從冰箱取出并在 37℃水浴中快速融化病毒,吸去細(xì)胞原有培養(yǎng)基,將病毒原液加入細(xì)胞中,輕輕8字混勻。感染后第二天(約12小時(shí)),吸去含病毒的培養(yǎng)液,換上新鮮的*培養(yǎng)液,繼續(xù)37℃培養(yǎng)。感染后48小時(shí),對于帶 GFP報(bào)告基因的病毒,可通過熒光顯微鏡觀測GFP表達(dá)效率,對于攜帶 Puromycin抗性基因的病毒,換上含適當(dāng)濃度的 Puromycin 的新鮮*培養(yǎng)液,篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞株。

上一篇 菌種的保存方法 下一篇 如何正確的進(jìn)行ELISA測定操作

上海一研生物科技有限公司      總流量:537181  GoogleSitemap  ICP備案號:滬ICP備14030958號-9
電話:021-69985186  手機(jī):15021460884  聯(lián)系人:吳先生  郵箱:3004979817@qq.com

收縮
  • 在線咨詢
  • 點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
  • 點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
五月网丁香网婷婷网| 鸡巴好大vip在线| 久久久久久国产美女| 熟女骚B日韩懂色AV| 欧美成人久久久久久久| 天天综合亚洲中文有码| 天天干夜炮| 婷婷5月 深爱5月| 国产亚洲欧美高潮| 欧美亚洲国产黄| 色欲a久久精品一区二区国产| 人人妻人造视频| 精品久久久通道| 日韩五十路无码视频入口| 狠狠操狠狠爱| 亚洲国产一线二线三线AV| 国产精品久久久久久久久不卡| 亚州综人一区| 日韩一级欧美国产一级| 日韩中文字幕高潮| 国内av不卡一区| 久久久靖品2区| 欧美黄一级片| 乱伦电影一区二区三区四区| 日韩欧美亚洲天天干| 51精品韩国美女主播久久| 日韩欧美一区8c| 欧美 日韩 高清 国产 在线| 欧美一区人妻| 日韩肛交网| 欧美一区二区三区伊人| 草视频免费| 美女被操b软件| H肉综合网| 爆菊花黄色无码视频| 日韩欧美三级电影院久久久按摩| 亚洲欧美日韩国产一区二区在线观看| 日本欧美黄色电影| 一区二区影剧院| 国产一区六区| av丝袜国产在线|